Застосування реакцію Фогеса-Проскауэра для мікробіологічної диференціації ентеробактерій

Постановка тесту

Постановка реакції Фогеса-Проскауэра передбачає попереднє культивування мікроорганізмів. Чиста культура висівається на диференціально-діагностичне середовище Кларка, варіація якої – бульйон Кларка (без додавання агар-агару). Використовується або готова середовище, або приготована самостійно. Склад включає:

  • 5 г пептона;
  • 5 г глюкози;
  • 5 р двухосновного фосфату калію;
  • 1 л дистиляту.

В ході дослідження проводиться посів культури стерильною бактеріологічною петлею в рідку середу. Кількість – 5 мл у пробірці плюс контроль. Інкубація здійснюється при температурі 35-37 градусів протягом двох діб. Далі поетапно проводять дослідження реакцію Фогеса-Проскауэра:

  • 2,5 мл культури на бульйоні переносять у стерильну пробірку.
  • Вносять шість крапель альфа-нафтола (5%-ний спиртовий розчин).
  • Додають 40%-ний розчин їдкого калі в кількості 0,1 мл, або дві краплі.
  • Перемішування здійснюють обережним струшуванням пробірки.
  • Оцінюють результат через 15 хвилин від початку експерименту.
  • Альтернативний метод проведення тесту – нічна інкубація, час якої скорочують до 18 годин до доби. Крім такого методу застосовують також експрес-тест: вносять петлею в 2 мл середовища культуру, інкубують близько чотирьох годин, далі додають реагенти в рівній кількості 2-3 крапель, перемішують і оцінюють результат за десять хвилин.

    Контролем виступає один із збудників пневмонії Klebsiella pneumoniae – штам atcc 13883.