Експресія складів
Рекомбінантний білок CFP10-ESAT 6 виробляється і застосовується для створення вакцин. Такий алерген туберкульозний дозволяє посилити імунітет і виробити антитіла. Загалом, молекулярні дослідження включають вивчення будь-якого аспекту білка, такого як структура, функція, модифікації, локалізація або взаємодії. Щоб дослідити, як конкретні речовини регулюють внутрішні процеси, дослідникам зазвичай потрібні кошти для виробництва функціональних сполук, що представляють інтерес та користь.
Враховуючи розмір і складність білків, хімічний синтез не є життєздатним варіантом для цього починання. Замість цього, живі клітини і їх клітинні механізми зазвичай використовуються як фабрики для створення і конструювання речовин на основі наданих генетичних шаблонів. Система експресії рекомбінантних білків надалі виробляє необхідну структуру для створення ліків. Далі відбувається відбір необхідного матеріалу для різної категорії препаратів.
На відміну від білків, ДНК легко конструювати синтетично або in vitro, використовуючи добре зарекомендували себе методи рекомбінантної. Отже, ДНК-матриці специфічних генів, з доданими репортерными послідовностями або послідовностями афінних міток або без них, можуть бути сконструйовані в якості матриць для експресії досліджуваного речовини. Такі склади, отримані з таких ДНК-матриць, і називаються рекомбінантними білками.
Традиційні стратегії експресії речовини включають трансфекцію клітин за допомогою ДНК-вектора, який містить матрицю, і подальше культивування клітин з тим, щоб вони транскрибували і транслювали бажаний білок. Зазвичай клітини потім лизируют для екстракції экспрессированного складу для подальшого очищення. Рекомбінантний білок CFP10-ESAT6 обробляється таким чином і проходить систему очищення від можливого утворення токсинів. Тільки після цього він надходить для синтезування в вакцину.
Як прокариотические, так і эукариотические in vivo системи експресії молекулярних речовин широко використовуються. Вибір системи залежить від типу білка, вимог до функціональної активності і бажаного виходу. Ці системи експресії включають ссавців, комах, дріжджів, бактерій, водоростей і клітин. У кожної системи є свої переваги і проблеми, і вибір правильної системи для конкретного застосування важливий для успішної експресії досліджуваного в статті речовини.
